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上海佰利萊生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
人HELA宮-頸-癌細(xì)胞
  • 英文名稱:Human HELA cervical cancer cells
  • 品牌:佰利萊
  • 產(chǎn)地:上海
  • 型號(hào):咨詢客服
  • 貨號(hào):bll-f53455
  • 發(fā)布日期: 2023-04-06
  • 更新日期: 2024-12-27
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 上海
保存條件 -80℃
品牌 佰利萊
貨號(hào) bll-f53455
用途 咨詢客服
檢測(cè)方法 傳代細(xì)胞
保質(zhì)期 電詢
適應(yīng)物種 人,大鼠,小鼠,等動(dòng)植物
檢測(cè)限 37℃, 5%CO2, 95%AIR
數(shù)量 99
英文名稱 Human HELA cervical cancer cells
包裝規(guī)格 咨詢客服
標(biāo)記物 上皮樣
樣本 血清,尿液,唾液,組織
應(yīng)用 科研實(shí)驗(yàn)
是否進(jìn)口

人HELA宮 頸 癌細(xì)胞說明書

T25細(xì)胞到貨處理

觀察:

1 、收到細(xì)胞后,請(qǐng)及時(shí)核對(duì)培養(yǎng)瓶上標(biāo)注的細(xì)胞名稱是否與訂購(gòu)的細(xì)胞名稱一致以及培養(yǎng)瓶是否有破損或漏液等異常情況。
處理:
1 、75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2 、顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存 (40x, 100x,200x 各一張) 前三天照片為重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。
3 、不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

4 、收到細(xì)胞后,及時(shí)查看說明書是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞形態(tài),并按常規(guī)貼壁或懸浮細(xì)胞的傳代方法操作。


貼壁:未超過80%匯 合度時(shí),將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml 完全培養(yǎng)基,放入37°C 、5%C02 孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。首 次傳代,建議1:2傳代(兩個(gè)T25) 。(傳代時(shí)建議-瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外- -瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng)。)
特殊細(xì)胞注意事項(xiàng):個(gè)別細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過程中發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正常現(xiàn)象。請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm 離心5min, 收集上清(后期對(duì)比培養(yǎng)使用),沉淀加入胰酶1-2ml ,輕輕吹打,重懸,消化1-2 分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8m/瓶,最 后放入37°C ,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
(注意:如收到密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)時(shí)要將培養(yǎng)瓶蓋子擰松)

凍存細(xì),胞到貨處理
1、收到細(xì)胞后,檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已完全揮發(fā)等問題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。
2、將細(xì)胞取出轉(zhuǎn)移至液氮或一80度冰箱保存,建議盡早復(fù)蘇。
3、復(fù)蘇第 一管如有活性狀態(tài)問題及時(shí)與我們聯(lián)系,會(huì)有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再?gòu)?fù)蘇第 二管。特別說明:未與我方聯(lián)系擅自復(fù)蘇第 二管出現(xiàn)問題不予售后。

細(xì)胞復(fù)蘇
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意: 佩戴防爆管面具),快速將其置入37°C 水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75% 的酒精擦拭凍存管壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄.上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種T25培養(yǎng)瓶,于37°C ,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4、第 二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代

1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS 清洗細(xì)胞一次: .
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml 完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中,1000rpm 離心5min;
3、棄上清,沉淀細(xì)胞用1-2ml完全培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶, 最 后放入37°C ,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); .


細(xì)胞凍存

1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄T25 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS 清洗細(xì)胞-次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml 完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中,1000rpm 離心5min;
3、
棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml/支的富衡無(wú)血清凍存液(FH7001) ,混勻后加入凍存管中。(如:凍一支,加入1ml無(wú)血清凍存液)將凍存細(xì)胞直接放入一80°C冰箱即可;如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80C冰箱存放24小時(shí)以上。
本庫(kù)的細(xì)胞系(株) 僅用于科研工作。







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