產(chǎn)品展廳
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A7r5 (大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
- 品牌：佰利萊生物
- 產(chǎn)地：上海
- 型號(hào)：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
- 貨號(hào)：BLL-X90376
- 價(jià)格： ￥1200/瓶
- 發(fā)布日期： 2023-02-17
- 更新日期： 2024-12-27
產(chǎn)品詳請(qǐng)
| 產(chǎn)地 | 上海 |
| 保存條件 | 凍存 |
| 品牌 | 佰利萊生物 |
| 貨號(hào) | BLL-X90376 |
| 用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
| 檢測(cè)方法 | |
| 保質(zhì)期 | 一年 |
| 適應(yīng)物種 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 檢測(cè)限 | |
| 數(shù)量 | 99 |
| 包裝規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 標(biāo)記物 | / |
| 樣本 | / |
| 應(yīng)用 | 實(shí)驗(yàn)研究 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
A7r5 大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品基本信息
細(xì)胞名稱：A7r5，大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
種屬來(lái)源：大鼠
組織來(lái)源：大鼠胸大動(dòng)脈
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基:： DMEM（含 NaHCO3 1.5g/L）+10% FBS+1%GlutaMAX-1+PS
生長(zhǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
傳代方法：1:2 至 1:3，每周 2-3 次
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
支原體檢測(cè)：無(wú)
注：該細(xì)胞在 DMEM（含 NaHCO3 1.5g/L）培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好，若使用 DMEM（含 NaHCO3 3.7g/L）培養(yǎng)該細(xì)胞需要提高 CO2濃度（7%-10%）。
細(xì)胞培養(yǎng)操作
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 4 mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min，棄去上清液，加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6 cm 皿中，加入約 4 mL完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加 2-3ml 完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm 離心 5 min，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2 mL 培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8 mL 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm 條件下離心 4 min，棄去上清液，用 PBS 清洗一遍，棄盡 PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度 5×10 6~1×10 7/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存 1mL 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否完全揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 說(shuō)備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后開(kāi)始傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。
